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      人正常結腸上皮細胞;NCM460

      簡要描述:人正常結腸上皮細胞;NCM460
      收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯系。如包裝完好,取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時,以穩定細胞狀態。

      • 產  地:上海
      • 廠商性質:經銷商
      • 更新時間:2021-01-21
      • 訪  問  量:1015

      詳細介紹

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      人正常結腸上皮細胞;NCM460

      細胞英文(簡稱):NCM460

      細胞名稱:人正常結腸上皮細胞;NCM460

      背景資料

      收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯系。如包裝完好,取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時,以穩定細胞狀態。 

      細胞來源:incell

      代次:P3

      規格:T25

      細胞數:1x10^6 cells

      組織來源:結腸上皮

      人正常結腸上皮細胞;NCM460形態:貼壁

      細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

      細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

      培養條件:1640+10% FBS;37℃,5% CO2    

      傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次

      凍存條件:90%FBS+10%DMSO

      動物細胞培養,大致的步驟是這樣:

      1.從動物胚胎或者一些剛出生的動物的器官或者組織上取得細胞,配制成細胞懸浮液.把細胞液放到培養瓶中,在培養箱里培養--------原代培養.

      但是,不要以為這樣就能一直無限培養下去.

      因為人正常結腸上皮細胞;NCM460在那個瓶壁上生長的時候,如果大量增殖,細胞之間會彼此相碰,細胞細胞就會停止分裂增殖,出現一種接觸抑制.

      2.我們為了它們能繼續增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細胞懸浮液,分開裝到好幾個瓶子里繼續培養--------傳代培養.

      1.      棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      2.      加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
      3.      按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
      4.      將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
      3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

       
      注意事項:
      1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
      2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
       
       

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